开发一种基于膜的Gi-CASE生物传感器试验,用于在大麻素受体上分析化合物
Morgan Scott-Dennis1,2, Fikri A Rafani1,2, Yicheng Yi1,2
1Division of Physiology, Pharmacology and Neuroscience, School of Life Sciences, University of Nottingham, Nottingham, United Kingdom.
Frontiers in pharmacology
|August 28, 2023
概括
一种新的基于膜的测定方法可以可靠地检测G蛋白对大麻素受体 (CBR) 的信号传递. 该系统通过表征受体活性,有助于开发更安全,更有效的治疗方法.
科学领域:
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 大麻素受体 (CBRs) 是疼痛,炎症和能量平衡的关键.
- 检测Gαi蛋白信号的现有方法具有挑战性.
- 开发针对CBRs的新疗法需要更好地了解受体信号传递.
研究的目的:
- 开发一种强大的基于膜的测试,用于Gαi蛋白信号传递.
- 为了能够可靠地检测和表征大麻素受体活性.
- 为了促进高通量选Gαi-合受体.
主要方法:
- 开发了一种基于膜的Gαi信号系统,使用过度表达CBR的HEK293TR细胞和Gαi-CASE生物传感器.
- 使用生物发光共振能量转移 (BRET) 来监测Gαi蛋白激活.
- 应用了384井格式的测定方法来分析参考大麻素化合物.
主要成果:
- 该试验成功检测到了大麻素配体的激素和逆激素活性.
- 具有CBR激动剂和逆激动剂的特征功效 (pEC50) 和疗效 (Emax).
- 结果与全细胞检测和文献价值相一致.
结论:
- 新型基于膜的Gi-CASE NanoBRET系统为Gαi蛋白信号测试提供了一种可靠的方法.
- 这种测定适用于各种Gαi合的GPCR,包括孤儿受体.
- 能够实时,更高的吞吐量测量用于药物发现的受体激活.
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