开发一个用于功能性ex vivo检测的Plasmodium vivax生物库
Rashmi Dash1,2, Kristen M Skillman3, Ligia Pereira1,2
1Goa Medical College and Hospital, Bambolim, Goa, 403202, India.
Malaria journal
|August 31, 2023
概括
一种优化的冷保存方法显著改善了Plasmodium vivax寄生虫的恢复和生存. 这个经过验证的协议使得能够创建一个强大的Plasmodium vivax生物库,用于基本的功能测试.
科学领域:
- 疟疾学 疟疾学
- 寄生虫学的寄生虫学
- 这是生物银行.
背景情况:
- 活菌是疟疾的主要原因,但由于缺乏持续的体外培养,其研究受到阻碍.
- 建立一个临床分离物与多个冷保存样本的生物库对于功能性测试至关重要.
研究的目的:
- 为了比较Plasmodium vivax临床分离物的不同冷保存方法.
- 建立和验证一个优化的协议,用于生成一个Plasmodium vivax寄生虫生物库.
主要方法:
- 对比了四种基于甘油酸盐的冷保存混合物,用于九种P. vivax分离物.
- 评估了解后,丰富后 (KCl-Percoll,MACS) 和短期培养中的寄生虫恢复.
- 在 -80°C和液下评估了短期和长期储存效应.
主要成果:
- 一个2.5:1.5:1的甘氨酸:血清:RBC混合物显著改善了寄生虫的恢复和体外生存率.
- 产生了一个由106个分离物 (8个小瓶) 组成的生物库;验证显示,寄生虫病减少了25.3%,缩6.65倍,恢复率为22.0%.
- 在60%的隔离物体中,在48小时内观察到强大的寄生虫成熟到后期阶段;MACS丰富产生了30.0%的寄生虫血症.
- 在-80°C保存长达10年的时间对寄生虫的恢复,丰富或生存能力没有显著影响.
结论:
- 为Plasmodium vivax临床分离物开发了一种优化的冷保存方法.
- 该协议作为生成和验证Plasmodium vivax寄生虫生物库的模板,用于功能测试.
