在多种氧气环境下评估MTT和硫胺B细胞增殖试验
Ming Yao1,2, Glenn Walker3,4, Michael P Gamcsik3
1Department of Mechanical and Aerospace Engineering, North Carolina State University, 1840 Entrepreneur Drive, Raleigh, NC 27695-7910 USA.
Cytotechnology
|September 1, 2023
概括
细胞增殖的MTT试验在不同氧气水平下是不可靠的,与硫胺B试验不同. 在不同氧气环境中比较细胞生长时要谨慎使用MTT.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
- 生理学 生理学 生理学
背景情况:
- 细胞增殖对于生物过程至关重要.
- 量化代谢活性或总蛋白质的测试被用作细胞增殖的间接测量.
- 在不同的氧气条件下,这些间接测试的有效性仍然不清楚.
研究的目的:
- 为了评估在不同氧气部分压力 (pO2) 条件下常见细胞增殖试验的适用性.
- 为了比较细胞计数与代谢 (MTT) 和总蛋白质 (硫黄胺B) 测试,在一系列的pO2水平.
- 为了确定是否代谢和基于蛋白质的测定作为可靠的替代品细胞计数在可变的氧气环境中.
主要方法:
- 使用透的底部组织培养板来控制静态氧度 (2-139 mmHg pO2).
- 通过直接细胞计数测量细胞增殖.
- 细胞计数与3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium化物 (MTT) 和硫胺B测定结果进行了比较.
- 在Caco-2,MCF-7,MCF-10A和PANC-1人类细胞系中进行了测试.
主要成果:
- 在不同氧气条件下,MTT测试读数与Caco-2和PANC-1细胞中的细胞数不相关.
- 硫胺B测定在所有测试的氧气水平下显示出一致的性能和与细胞数的相关性.
- 两种MTT和硫胺B测定都显示了在特定氧气环境中的细胞数量与相关性.
结论:
- 在不同氧气条件下比较细胞增殖时,MTT试验不是细胞计数的可靠替代品.
- 硫黄胺B测定是一种更强大的方法,用于评估在不同氧气环境下的细胞增殖.
- 在用于细胞生长或药物反应研究中使用MTT测定时,建议谨慎使用在不同氧气条件下培养的细胞.
