用流细胞计和细胞分类来分离人类BCAM阳性角膜原生细胞的协议
Yuzuru Sasamoto1, Philip C Yeung2, Johnathan Tran3
1Division of Genetics, Brigham and Women's Hospital, Boston, MA, USA; Transplant Research Program, Boston Children's Hospital, Boston, MA, USA.
STAR protocols
|September 5, 2023
概括
这项研究详细介绍了一项隔离BCAM阳性基底四肢上皮细胞的协议,这对角膜再生至关重要. 这些细胞使用流细胞计来识别,以更好地了解角膜上皮分化.
科学领域:
- 眼科医生 眼科 眼科
- 细胞生物学 细胞生物学
- 再生医学是一种再生医学.
背景情况:
- 基底四肢上皮细胞对于角膜表面的维护和再生至关重要.
- 具有BCAM阳性的细胞代表了具有全克隆形成能力的早期过渡放大细胞群 (TAC).
- 了解这些细胞是开发角膜修复策略的关键.
研究的目的:
- 提出一个详细的协议,以隔离BCAM阳性细胞从人类捐赠者的角膜.
- 为了进一步研究调节角膜再生的因素.
- 为了促进角膜上皮分化和全克隆形成的研究.
主要方法:
- 人体捐赠角膜被切割和分离.
- 细胞被染色为流细胞计的特定抗体.
- 用细胞分类来净化BCAM阳性和BCAM阴性细胞.
- 纯化的细胞被培养为全克隆和细胞叶形成试验.
主要成果:
- 建立了一个可靠的协议,以隔离BCAM阳性基底四肢上皮细胞.
- 该协议允许分离BCAM阳性和BCAM阴性细胞群.
- 隔离的细胞适合用于与角膜再生相关的功能测试.
结论:
- 本方案有效隔离BCAM阳性细胞,这是角膜再生的关键群体.
- 这种方法支持研究支角膜上皮分化的细胞机制.
- 这些发现有助于推进眼科和再生医学方面的研究.


