GPR114/ADGRG5是由其绑定激动剂激活的,因为它是一个分裂粘附的GPCR
Tyler F Bernadyn1, Alexander Vizurraga1, Rashmi Adhikari1
1Department of Pharmacology, University of Michigan Medical School, Ann Arbor, Michigan, USA.
像GPR114这样的粘附G蛋白结合受体 (AGPCR) 经历自我分裂,这对于它们的激活至关重要. 这项研究证实了GPR114的裂变及其在Gs蛋白信号传递中的作用,特别是在色素细胞中.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 分子信号传输的方法
- G 蛋白结合受体的受体.
背景情况:
- B2家族或粘附性G蛋白结合受体 (AGPCRs) 具有独特的诱导自蛋白分解的域,负责自我分裂.
- 这种裂变产生N-终端 (NTF) 和C-终端 (CTF) 碎片,这些碎片保持关联,直到带结合或机械力诱导解离.
- 解离暴露了一个绑定的激动剂 (TA),激活受体的七个跨膜域 (7TM).
研究的目的:
- 调查孤儿AGPCR,GPR114的裂变状态和激活机制,此前人们认为它没有裂变.
- 为了确定GPR114是否需要自我切割才能被其绑定的激动剂 (TA) 激活.
- 为了阐明由GPR114信号激活的特定G蛋白类.
主要方法:
- 使用免疫血清和生化分析来确认GPR114的裂变.
- 对GPR114和GPR56 GAINA子域进行了变异性研究,以评估自我切割效率.
- 对融合蛋白进行血栓激素处理,并将TA代药应用于EoL-1细胞,用于研究激活通路和cAMP产生.
主要成果:
- 证实GPR114是一种分裂受体,这种自我分裂对于其激活Gs蛋白来说是必要的.
- 突变性研究确定了GPR114和GPR56的GAINA子域中的关键特征,这些特征影响了自我分裂效率.
- GPR114 TA 型模拟剂刺激了 EoL-1 细胞中的 cAMP 生产,这是一个表达内源性 GPR114.4 的异性癌细胞系.
结论:
- GPR114经历自我分裂,这是通过其绑定的激动因子和随后通过Gs蛋白进行信号的先决条件.
- 这些发现挑战了关于GPR114未被切割的先前假设,并提供了对AGPCR激活的机制性见解.
- 这项研究可能有助于更好地理解GPR114在氨基基细胞功能中的作用,包括迁移,化学毒性和脱粒化.
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