特里科斯塔丁A用于有效的CRISPR-Cas9基因编辑人类多能干细胞

科学领域:

• 干细胞生物学 干细胞生物学
• 基因编辑技术的技术
• 表观遗传学 在表观遗传学中,表观遗传学是指表观遗传学.

背景情况:

• 人类诱导的多能干细胞 (iPSCs) 对疾病建模,药物发现和再生医学至关重要.
• 目前在iPSCs中进行的定期间隔短平行体重复 (CRISPR) -Cas9基因编辑通常是低效的,需要数周到数月的克隆生成.
• 提高iPSC基因编辑效率对于推进这些应用至关重要.

研究的目的:

• 开发一种提高iPSC基因编辑效率的策略.
• 为了研究基素脱乙酶抑制剂基素 A (TSA) 对 iPSC 基因编辑效率的影响.
• 评估TSA对染色体凝聚和非目标效应的影响.

主要方法:

• 在基因编辑过程中,应用Trichostatin A (TSA),一种I类和II类组分脱乙酶抑制剂.
• 使用聚类正规间隔短时间的平行体重复 (CRISPR) -Cas9系统进行基因组编辑.
• 评估基因编辑效率,染色体凝聚,非目标效应,基因组完整性和编辑的iPSC多能性.

主要成果:

• 在iPSCs中,TSA治疗降低了全球染色质凝结.
• 在iPSC中基因编辑效率在TSA应用时增加了两倍至四倍.
• 没有观察到非目标效应的增加,编辑的iPSC保持了基因组完整性和多能性.

结论:

• 三素A (TSA) 显著提高了在人类诱导的多能干细胞 (iPSCs) 中的CRISPR-Cas9调解基因编辑效率.
• 通过减少染色质凝聚作用,导致更快的编辑iPSC克隆的生成.
• 这一战略有望迅速生成具有治疗意义的基因编辑iPSCs,并保持多能性和基因组完整性.