基本的三维 (3D) 肠道模型系统与免疫组件
Francesca Truzzi1, Silvia Dilloo2, Xinyue Chang2
1Department of Agricultural and Food Sciences, Alma Mater Studiorum-University of Bologna; francesca.truzzi3@unibo.it.
Journal of visualized experiments : JoVE
|September 7, 2023
概括
使用细胞系的新3D肠道模型为研究炎症性肠道疾病提供了一种简单而复杂的替代动物试验方案. 该模型允许对组织变化和免疫反应进行详细分析,有助于药物查和毒性评估.
科学领域:
- 胃肠病学 胃肠病学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 越来越多的人对体外模型的需求,以取代肠道疾病研究中的动物研究.
- 为药物查和毒性测试需要标准化,生理上相关的肠道模型.
- 现有体外模型的现有局限性,用于全面分析炎症反应.
研究的目的:
- 通过使用细胞系,提出一个基本的,三维的 (3D) 肠道等效模型的协议.
- 为了证明该模型在研究炎症性肠道疾病和评估食品成分效应方面的实用性.
- 突出模型对简单,可重复和生理复杂实验结果的能力.
主要方法:
- 开发一个3D肠道模型,其中包括Caco-2肠细胞,U937单细胞和L929纤维细胞.
- 使用抛嵌入和血素和乙 (H&E) 染色用于光显微镜评估.
- 对紧密结蛋白表达 (occludin),免疫细胞激活 (CD14,CD11b),粘液产生和细胞因子释放 (midkine) 的分析,以应对诸如质和脂多糖类的刺激.
主要成果:
- 该模型成功地复制了一个健康的肠道单层,在炎症条件下观察到可量化的变化 (例如,减少厚度,屏障破坏).
- 质暴露导致了奥克卢丁表达和免疫细胞激活的减少,证明了该模型对食品成分的敏感性.
- 脂多糖刺激诱导了粘液染色和细胞因子释放的增加,验证了模拟肠道炎症的模型.
结论:
- 开发的3D肠道模型为研究炎症状态和屏障完整性提供了一个强大的和多功能平台.
- 该模型允许从固定组织部分分析多个可量化的视觉参数,从而提高实验效率.
- 这种基于细胞的体外系统是肠道科学中各种研究应用中动物模型的有价值的替代品.
