从诱导的多能干干细胞中生成悬浮的器官
Langping Gao1, Yue Wang2, Gang Wang3
1Department of Nephrology, The Children's Hospital, Zhejiang University School of Medicine; Zhejiang University School of Medicine.
Journal of visualized experiments : JoVE
|September 7, 2023
概括
这项研究详细介绍了从诱导多能干细胞 (iPSC) 生成器官的协议. 该方法使用定义的介质和特定的生长因子来创建用于研究应用的 nefron 结构.
科学领域:
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 发展生物学 发展生物学
- 再生医学是一种再生医学.
背景情况:
- 诱导多能干细胞 (iPSC) 是产生器官的有希望的来源.
- 器官是疾病建模,药物查和再生疗法的宝贵工具.
- 现有的器官生成协议需要优化,以提高效率和一致性.
研究的目的:
- 介绍一个详细的,逐步的协议,从iPSCs产生脏器官.
- 优化细胞密度和生长因子度等关键参数,以成功形成有机体.
- 建立一种可复制的方法来制造具有独特脏结构的脏器官.
主要方法:
- 使用了定义的,没有动物成分的介质 (APEL 2).
- 使用一种特定的WNT激动剂 (CHIR99021) 和纤维细胞生长因子9 (FGF9) /肝素治疗方案.
- 从后原始条纹 (PS) 到中间间皮层 (IM) 阶段开始的分化.
- 在悬浮中培养细胞,使用低附着板来促进脏发育.
主要成果:
- 成功生成脏器官,表现出丸状,近端管状和远端管状结构.
- 确定了最佳的初始细胞密度和CHIR99021度作为成功的关键因素.
- 在悬浮培养中证明了中间介质皮的发展成为复杂的脏结构.
结论:
- 本协议提供了一种高效和特定的方法,用于从各种iPSC中产生脏器官.
- 这种技术为疾病建模和药物发现提供了一致和成功的结果.
- 详细的协议支持脏器官技术的进步,用于治疗应用.
