抗体批量克隆 抗体批量克隆
Rico Ballmann1, Kai-Thomas Schneider1, Kristian Daniel Ralph Roth1
1Technische Universität Braunschweig, Institute of Biochemistry, Biotechnology and Bioinformatics, Braunschweig, Germany.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|September 7, 2023
概括
这项研究引入了一种高通量克隆协议,用于快速选双价格格的抗体候选者. 这种新方法简化了双价抗体分子的生产和分析,以提高特性.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 菌体显示对于抗体发现至关重要,最初的查使用单价单链可变片段 (scFv).
- 鉴定抗体克隆的特征通常需要像IgG或scFv-Fc融合这样的双价格格式来进行准确的评估.
- 目前生产双价抗体的方法包括对V区域基因进行繁的克隆程序,将其转化为表达载体.
研究的目的:
- 开发一种高通量程序,以快速选双价格格的抗体候选者.
- 为选择的抗体碎片建立并行克隆协议,将其转化为哺乳动物表达载体.
- 为了实现高效的生产和分析双价抗体分子在一个96井板格式.
主要方法:
- 一个新的高通量协议,用于将抗体碎片并行克隆到哺乳动物表达载体中.
- 采用96井板格式,用于简化克隆和随后的抗体生产.
- 在96孔板中生产和净化双价抗体分子 (例如,IgG,scFv-Fc).
主要成果:
- 在双价格格式中成功建立了用于抗体查的高通量程序.
- 证明了选择的抗体片段的并行克隆,将其转化为哺乳动物表达载体.
- 能够快速生产和净化用于下游测定的双价抗体分子.
结论:
- 开发的协议显著加速了抗体候选人的查和表征.
- 这种高通量方法简化了双价抗体的生产,减少了劳动和时间.
- 96井板格式为药物发现和研究提供了双价格格的抗体克隆的高效分析.
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