一个高吞吐量微流体机械孔平台,使细胞基试验中的循环的细胞内传递成为可能

科学领域:

• 生物技术和生物医学工程 生物技术和生物医学工程
• 分子和细胞生物学分子和细胞生物学
• 药物发现和开发 药物发现和开发

背景情况:

• 循环对向细胞内蛋白质-蛋白质相互作用有很大的希望,但由于细胞不透性而面临挑战.
• 微流体机械穿孔允许大分子的细胞内输送,但受到手动,低通量有效载荷混合的限制.
• 在微流体流失 (μVS) 后的暂时细胞透性为细胞溶液输送提供了一个窗口.

研究的目的:

• 开发一种高通量系统,用于细胞内输送不透的循环.
• 为了克服手动有效载荷混合在微流体机械穿孔中的局限性.
• 为了能够快速选针对细胞内标的类活性.

主要方法:

• 开发配送微流体流散 (DμVS),将μVS与基于微板的配送集成在一起.
• 软件驱动的反循环控制压力,流量,输送和自动输送的运动平台.
• 使用针对MDM2的不透的验证,采用点击化学,NanoBRET和p53记者细胞测试.

主要成果:

• 在几分钟内,DμVS系统成功地将低微升体积输送到数百个微型板井 (<96个板的2.5分钟).
• 在96个井板上证实了透性MDM2向的强大的细胞溶液输送.
• 在低微分子度下确定了细胞无活性MDM2结合的功能性细胞活性.

结论:

• DμVS 能够有效地,高通量地将像循环片这样的不透的宏分子传递到细胞内.
• 该系统有助于快速进行结构-活性关系研究,并为潜在的治疗方法提供早期的生物学证明.
• DμVS 是一种多功能工具,可以以可扩展的方式研究细胞内目标参与.