基于Cas9分裂的合成电路用于检测细胞事件.
Alicja Przybyszewska-Podstawka1, Jakub Czapiński1, Joanna Kałafut1
1Department of Biochemistry and Molecular Biology, Medical University of Lublin, 20-093, Lublin, Poland.
Scientific reports
|September 11, 2023
概括
这项研究适应了分裂的Cas9来创建生物逻辑门. 这些合成生物学工具可以感知癌细胞的起源,表皮细胞转移到介质细胞 (EMT) 和细胞融合,从而实现新的生物传感器应用.
科学领域:
- 合成生物学 合成生物学
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 合成生物学利用逻辑门来控制生物功能.
- 克里斯普尔技术被广泛使用,但不太适用于超出gRNA控制的逻辑门.
- 分离Cas9为工程生物学逻辑门提供了一种新的方法.
研究的目的:
- 调整分裂Cas9以创建感知特定生物事件的逻辑门.
- 开发一种检测癌细胞起源,EMT和细胞-细胞融合的系统.
- 为了证明Cas9作为生物传感器和执行器的多功能性.
主要方法:
- 在不同的促进器下,工程师将Cas9蛋白质半部分分解.
- 在Cas9复制中使用了自组合的素.
- 集成了一个Cas9报告员 (EGxxFP),用于基于光的输出.
主要成果:
- 开发了一个逻辑门,通过光检测表皮癌细胞起源.
- 创建了一个逻辑门,通过TWIST1.1触发的表皮细胞到介质细胞过渡 (EMT) 的传感.
- 在诱导和自然场景中使用分裂的Cas9逻辑门成功检测了细胞-细胞融合.
结论:
- 分离Cas9可以被设计成有效的逻辑门来感知生物事件.
- 该系统展示了检测癌细胞状态和细胞融合的潜力.
- 分成的Cas9系统提供了一个简单的,可集成的生物传感和执行平台.
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