使用CD19his间接染色的体内流动细胞测量化学抗原受体T细胞检测方法的优化和验证

科学领域:

• 免疫治疗是一种免疫疗法.
• 细胞疗法细胞疗法
• 流动细胞计量 (Flow Cytometry) 是一种流动细胞计.

背景情况:

• 针对CD19的化学抗原受体T (CAR-T) 细胞疗法在复发性/耐性B细胞恶性瘤中显示出显著的疗效.
• 在体内监测CAR-T细胞动力学对于了解治疗结果和毒性至关重要.
• 需要一种标准化,敏感的方法来检测CAR-T细胞.

研究的目的:

• 开发和验证一种强大,灵敏和通用的流细胞计法,用于检测针对CD19的CAR-T细胞.
• 为了比较CAR-T细胞的不同检测试验的性能.

主要方法:

• 开发和比较了使用商用试剂检测CD19CAR-T细胞的三种流动细胞计试验.
• 测试使用了重组的人类CD19蛋白片段,该片段与CAR的单链变量片段结合.
• 与直接染色 (CD19-FITC) 相比,评估了间接染色方法 (CD19his + anti-histidine-APC和CD19bio + anti-biotin-APC) 的使用情况.

主要成果:

• 与直接染色相比,间接染色试验,特别是CD19his,显示出更高的灵敏度和特异性.
• 该CD19his测定显示了有利的成本效益概况.
• 使用定量实时聚合酶连锁反应的验证证实了强烈的正相关性.
• CD19这种染色成功地集成到多色流细胞计面板中进行表型分析.

结论:

• CD19这种流细胞计染色为检测CAR-T细胞提供了一种可靠,强大和广泛适用的方法.
• 这种方法支持在体内监测各种抗CD19CAR-T产品和样本类型的CAR-T细胞动力学.
• 开发的试验是推动CAR-T细胞治疗研究和临床应用的宝贵工具.