数字PCR使用简单的PDMS微流体芯片和标准实验室设备
Kazuo Hosokawa1, Hitoshi Ohmori2
1Materials Fabrication Laboratory, RIKEN Cluster for Pioneering Research, 2-1 Hirosawa, Wako, Saitama, 351-0198, Japan. k-hoso@riken.jp.
概括
这项研究引入了一种负担得起的数字PCR (dPCR) 系统,使用微流体芯片和标准实验室设备. 这一创新使得精确的核酸量化可供更多实验室使用.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 数字PCR (dPCR) 可以在没有校准的情况下提供敏感的核酸量化.
- 由于专用仪器的高成本,dPCR的广泛采用受到限制.
研究的目的:
- 开发一个可访问和具有成本效益的dPCR系统.
- 为了证明使用dPCR的常见实验室工具的可行性.
主要方法:
- 使用PDMS和玻璃制造了一个具有24,840个微的微流体芯片.
- 在PDMS脱气驱动液体控制中,将PCR混合物限制在微井中.
- 标准的热循环器和手工制作的水被用来进行热循环和防止蒸发.
主要成果:
- 通过光成像,可以清晰地区分正和负微波.
- 模板度使用波桑分布理论准确估计.
- 该系统证明了在广泛的度范围内 (1.3213,200副本/μL) 的准确量化.
结论:
- 开发的dPCR系统为昂贵的商业仪器提供了低成本的替代方案.
- 这种方法有助于在不同的实验室环境中更广泛地实施数字PCR.
- 该方法允许在没有外部校准的情况下进行敏感和精确的核酸量化.
