信托标记器的运动选,以提高SMLMLM中的定位精度和分辨率

科学领域:

• 超高分辨率显微镜的使用方法
• 生物物理学的生物物理.
• 图像分析 图像分析

背景情况:

• 单分子定位显微镜 (SMLM) 实现了高分辨率,但需要精确的漂移校正.
• 信托标记通常用于漂移校正,假设它们是静止的.
• 现有的方法缺乏有效的方法来评估标记器运动,而不仅仅是简单的漂移.

研究的目的:

• 开发一种定量方法来评估与SMLM样本相对的信托标记运动.
• 评估标记运动对SMLM图像质量和分辨率的影响.
• 通过选择适当的信托标记来优化漂移校正策略.

主要方法:

• 使用平均平方位移 (MSD) 分析对信托标记运动的定量评估.
• 在SMLM成像缓冲器中对珠子的MSD值进行比较,与干样相比.
• 从漂移纠正算法中排除高MSD珠.
• 使用SMLM成像对细胞微管的实验验证.

主要成果:

• 在SMLM缓冲器中90%以上的固定光珠显示出比静止珠更高的MSD.
• 信托珠子表现出相对于成像场的不同程度的摇摆.
• 排除高MSD珠子显著改善了漂移校正准确度和定位精度.
• 使用低MSD珠子进行漂移校正,提高了SMLM图像分辨率和质量.

结论:

• 平均平方位移 (MSD) 分析提供了一种有效的方法来评估相对信托标记物运动.
• 基于MSD的信任标记的预选对于优化SMLM成像至关重要.
• 这种方法可以提高SMLM中的图像质量,分辨率和定位精度.