合成诺基因序列的模块化聚合发现以编程持久的细胞疗法
Franziska Blaeschke1, Yan Yi Chen1, Ryan Apathy1
1Gladstone-UCSF Institute of Genomic Immunology, San Francisco, CA 94158, USA; Department of Medicine, University of California, San Francisco, San Francisco, CA 94143, USA.
Cell
|September 15, 2023
概括
一个新的查平台,ModPoKI,可以快速比较基因修饰,以改善T细胞疗法. 它确定了一种转录因子构造物 (TFAP4),该构造物增强了对抗癌症的CAR-T细胞功能.
科学领域:
- 免疫学
- 分子生物学
- 生物工程
背景情况:
- 慢性刺激会损害T细胞功能,限制细胞免疫疗法的有效性.
- 开发选多种遗传修饰的方法对于重新编程T细胞功能至关重要.
- 现有的方法缺乏可扩展性来比较大型合成序列库.
研究的目的:
- 开发一个可适应的DNA knockin (KI) 库的高通量选平台.
- 在慢性刺激下,确定增强T细胞适应性和抗癌功能的遗传结构.
- 为了发现复杂的基因组合,
主要方法:
- 开发了模块化聚合KI选 (ModPoKI),使用条形码适配器构建模块化DNAKI库的平台.
- 创建了包含100个转录因子 (TF) 和129个表面受体 (SR) 的ModPoKI库.
- 对人类T细胞受体 (TCR) 和化学抗原受体 (CAR) T细胞进行了超过30次ModPoKI查.
主要成果:
- 鉴定了一种转录因子AP4 (TFAP4) 构造物,在体外和体内显著增强了CAR- T细胞适应性和抗癌活性.
- 通过生成大约10,000个TF组合的库,证明了ModPoKI的模块化性.
- 通过使用BATF-TFAP4多晶构造的非病毒基因组来提高T细胞适应性,同时过度表达BATF和TFAP4调节关键基因标.
结论:
- 这是一个有效的平台来发现复杂的遗传结构来编程细胞功能.
- TFAP4和BATF的共同表达可以重编程T细胞功能,在慢性刺激期间增强适应性.
- 这种平台加速了改进的细胞免疫疗法的发展.


