外基因组及其miRNA/蛋白质概况在角膜 stromal 细胞中
Rachel Hadvina1, Mariam Lotfy Khaled2, Theresa Akoto3
1Department of Cellular Biology & Anatomy, Augusta University, Augusta, GA, 30912, USA; Center for Biotechnology and Genomic Medicine, Medical College of Georgia, Augusta University, Augusta, GA, 30912, USA.
Experimental eye research
|September 15, 2023
概括
角膜 (KC) 患者的外体显示出独特的miRNA和蛋白质配置文件,这表明它在角膜疾病的发展中发挥了作用. 这些发现突出了外体作为潜在的生物标志物和KC的治疗点.
科学领域:
- 眼科医生 眼科 眼科
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 角膜 (KC) 是一种渐进的角膜疾病,导致皮肤变薄和视力受损.
- 外体,纳米级囊泡调解细胞间通信,越来越多地被认为是它们在疾病发病过程中的作用.
- 了解KC中的外体组合对于开发新型诊断和治疗策略至关重要.
研究的目的:
- 鉴定和比较有角膜瘤和没有角膜瘤的个体中初级角膜纤维细胞分泌的外体.
- 为了识别来自形纤维细胞的外体中独特的miRNA和蛋白质签名.
- 探索这些外体差异在形的发展中的潜在作用.
主要方法:
- 通过连续超离心法从人类角质 (HKC) 和健康的 (HCF) 角膜 stromal 纤维细胞中分离出外体.
- 纳米粒子追踪分析 (NTA) 对于外体大小和度.
- 传输电子显微镜 (TEM) 和西部抹杀用于外体标记物识别 (CD81,CD9,CD63).
- qRT-PCR用于外体miRNA分析和质谱测量用于蛋白质组分析.
主要成果:
- 来自HKC和HCF的外体体在尺寸,数量或形态上没有显著差异.
- 在所有样本中证实了外体标志物CD81,CD9和CD63.
- 不同表达分析揭示了HKC外体中独特的miRNAs (例如,miR-328-3p,miR-532-5p) 和其他人的改变表达 (let-7c-5p,miR-665).
- 蛋白质基因分析在HKC外体中发现了12个上调和2个下调调的蛋白质,这些蛋白质参与了与KC病原发生相关的细胞过程.
结论:
- 与健康对照组相比,HKC衍生的外体具有不同的miRNA和蛋白质配置文件.
- 这些差异表达的分子表明外体在形病原发生过程中的潜在作用.
- 需要进一步的研究来阐明这些外体变化的功能影响在KC的发展和进展.
