一种基于试验的间接竞争性方法,用于使用基于实时光的定量聚合酶连锁反应来敏感确定四环素残留物

科学领域:

• 环境化学环境化学
• 分析化学 分析化学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 四环素 (TC) 抗生素在人类和兽医中广泛使用,导致环境污染和食品中的残留物.
• 不适当使用TC会带来生态风险和潜在的健康危害.
• 需要敏感,准确和具有成本效益的方法来检测环境和食品矩阵中的低TC度.

研究的目的:

• 开发一种新的,灵敏的,具有成本效益的基于aptamer的测定方法,用于检测四环素 (TC) 残留物.
• 通过实时光定量聚合酶连锁反应 (FQ-PCR) 来利用信号放大来提高检测.
• 为了最大限度地提高效率,使用响应表面方法来优化测试条件.

主要方法:

• 设计了一种间接的竞争性阿普塔米尔试验,将阿普塔米尔和信号DNA链整合在一起.
• 实时光定量聚合酶链反应 (FQ-PCR) 用于信号放大和检测.
• 响应表面的方法被用来优化特定的吸收体,信号DNA和DNA捕获器的度.

主要成果:

• 对于TC合体 (Apt40),信号DNA和DNA捕获器的最佳度分别为112nM,115nM和83nM.
• 在Ct值和TC度的对数 (R2 = 0.998) 之间观察到一个线性关系,在10−3-103 ng mL−1.1的范围内.
• 该方法在加废水,蜂蜜和牛奶样本中实现了低检测极限 (7.02 × 10−5 ng mL−1) 和高平均回收率 (101.19%).

结论:

• 开发的以阿普坦基基的FQ-PCR试验为检测四环素残留物提供了高灵敏度和选择性.
• 该方法适用于监测环境和食品样本中的TC污染,解决了对可靠分析工具的需求.
• 该方法表明,通过使用特定的体,可以检测其他抗生素残留物的潜力.