使用CRISPR-Cas12a调解试验快速检测水病毒:实验室验证和评估研究

科学领域:

• 分子诊断学 分子诊断
• 病毒病原体检测 病毒病原体检测
• 基于CRISPR的测试方法

背景情况:

• 2022年的mopox (麻疹病毒,MPXV) 疫情需要在集中实验室之外进行改进的诊断.
• 目前的MPXV检测方法通常依赖于耗时的实验室程序.

研究的目的:

• 开发一种快速的,在临床样本中检测MPXV的临床检测方法.
• 使用同热放大与CRISPR-Cas12a技术相结合,以提高检测能力.

主要方法:

• 开发了一个便携式的异热放大CRISPR-Cas12a测定.
• 设计和优化了22个用于MPXV检测的原始引导RNA集.
• 与qPCR相比,使用光和侧流读数对临床样本和其他病原体进行验证的测试性能.

主要成果:

• 该试验实现了检测限值为1副本/μL,具有100%的特异性.
• 在185个临床样本上进行的一致性测试显示,光读取率为100%的灵敏度和99.3%的特异性.
• 侧流带显示了100%的灵敏度和98.6%的特异性,与光的总体一致性为96.8%.

结论:

• 开发的CRISPR-Cas12a试验表现出强大的性能特征,与mpox诊断中的qPCR相美.
• 该试验的可移植性和多功能性为资源有限的环境中检测MPXV提供了潜在的解决方案.
• 这项技术促进了基于社区的,对 mpox.的现场测试.