扩展显微镜使用单个子分子用于蛋白质和RNAs的高产量多重成像

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 显微镜的使用方法
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 扩展显微镜 (ExM) 通过物理扩大样本,使用标准光显微镜进行纳米尺度成像.
• 目前的ExM方法需要不同分子的特定定部分,使协议复杂化并增加成本.
• 有效地定各种生物分子,包括RNA,对于推进ExM应用至关重要.

研究的目的:

• 开发一种多功能定试剂,以简化和降低ExM协议的成本.
• 为了使蛋白质和RNAs在单个实验步骤中同时定.
• 证明新方法对细胞和组织的多式纳米分析的实用性.

主要方法:

• 引入了一种新型的多功能,一种烯酸氧化物,用于配备蛋白质和RNA.
• 实施一个统一的ExM (uniExM) 协议,使用烯酸环氧化.
• uniExM的应用,用于保存和可视化各种生物样本中的RNA转录和蛋白质.

主要成果:

• 烯酸环氧化成功地在一个步骤中装备了蛋白质和RNA.
• 与以前的RNA定策略相比,uniExM协议显示了显著的成本降低 (2-10倍).
• uniExM有效地保存和可视化了患者衍生的异种移植 (PDX) 癌症组织中的RNA转录和蛋白质.

结论:

• 开发的多功能和uniExM协议为ExM提供了一种简化且具有成本效益的方法.
• uniExM促进了RNA和蛋白质的纳米尺度可视化,扩大了ExM的适用性.
• 这种方法在多种细胞和组织研究,包括癌症诊断中的多式纳米分析中具有前景.