显微镜质量管理的组织式3D标准和协议
Benjamin Abrams1, Thomas Pengo2, Tse-Luen Wee3,4
1Life Sciences Microscopy Center, University of California, Santa Cruz, 1156 High Street, 150 Sinsheimer Labs, Santa Cruz, CA 95064, USA.
概括
研究人员开发了一种负担得起的3D光微球标准,用于对光显微镜进行基准测试. 这种生物相关的样本确保了实验室和设备之间可重复的结果,增强了科学严谨性.
科学领域:
- 生物医学成像学 生物医学成像学
- 显微镜的使用方法
- 生物光子学 生物光子学
背景情况:
- 标准化样本对于可复制的光显微镜至关重要.
- 现有的标准可能与生物相关,或不易准备.
- 生物医学资源设施协会 (ABRF) 光显微镜研究小组 (LMRG) 确定需要制定新标准.
研究的目的:
- 开发和验证一种新的,负担得起的,类似于3D组织的光显微镜标准.
- 为样本准备,图像采集和分析提供详细的协议.
- 为了能够对显微镜的性能作为深度的函数进行定量评估.
主要方法:
- 制备一个3D凝 (120微米厚,折射率1.365) 嵌入不同尺寸的光微球.
- 开发特定仪器的图像采集协议.
- 实现对分辨率 (点差函数),信号噪声比和光强度的自动图像分析.
主要成果:
- 3D标准成功地证明了由于折射率不匹配而导致的强度和分辨率的深度取决于损失.
- 在相似深度的物体之间的相对光强度始终保持不变.
- 该标准在不同的实验室,显微镜制造商和客观镜头类型中产生了可重复的结果.
结论:
- 开发的3D标准是全球光显微镜基准测试的强大和有价值的工具.
- 这一标准有助于提高光显微镜研究的科学严谨性和可重复性.
- 提供的协议和样品制备方法是科学界可以访问的.
