肺小鼠CD4+ T细胞的功能表型化使用多参数流细胞计分析
Céline M Maquet1, Laurent Gillet1, Bénédicte D Machiels1
1Laboratory of Immunology and Vaccinology, Faculty of Veterinary Medicine, FARAH, University of Liège, Liège, Belgium.
Bio-protocol
|September 27, 2023
概括
这项研究详细介绍了一种新的流细胞计法,用于分析病毒感染后肺部CD4+T细胞功能. 这项技术有助于了解免疫反应,并预防埃普斯坦-巴尔病毒 (EBV) 等病毒引起的肺损伤.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 病毒学 病毒学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 马疹病毒,包括爱斯坦-巴尔病毒 (EBV),显著影响宿主免疫反应.
- 在病毒感染期间,Ly6Chi单细胞在调节效应体CD4+T细胞功能的过程中发挥作用.
- 在小鼠中的Murid gammaherpesvirus 4感染作为人类EBV感染的模型.
研究的目的:
- 开发和验证用于多参数流细胞计的细胞内染色工作流.
- 分析CD4+T细胞子集的多功能性质,包括细胞毒性和调控功能.
- 为了研究病毒感染后肺 CD4+ T 细胞的功能异质性.
主要方法:
- 在感染后从小鼠肺部制备单细胞悬浮剂.
- 用蛋白质运输抑制剂和特定刺激介质培养肺细胞的ex vivo培养.
- 对细胞因子和细胞毒媒介进行多色表面和细胞内染色,然后进行流动细胞计分析.
主要成果:
- 建立了一种高分辨率的方法来描述肺透CD4+T细胞的功能性质.
- 工作流允许同时量化细胞毒性介质和促炎或抗炎细胞因子.
- 解读了在病毒挑战后被招募到肺部的CD4+T细胞的功能异质性.
结论:
- 开发的流式细胞计量协议提供了在病毒感染期间对CD4+T细胞反应的详细了解.
- 这项分析增强了对CD4+T细胞调节在预防病毒诱导的肺免疫病理学方面的重要性的理解.
- 该研究提供了一种全面的方法来分析单细胞水平的免疫细胞功能.
