对于Sup35蛋白体内相分离的属性和域要求
Bryan Grimes1, Walter Jacob1, Amanda R Liberman1
1Laboratory of Cell Biology, National Heart, Lung and Blood Institute, National Institutes of Health, Bethesda, MD 20892, USA.
Biomolecules
|September 28, 2023
概括
发芽酵母Sup35蛋白在体内形成不同的组件,需要其C端域和mRNA,与体内液滴不同. 这些类似压力颗粒的结构不同于之前观察到的Sup35液滴.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
- 蛋白质动力学 蛋白质动力学
背景情况:
- 发芽酵母中的Sup35蛋白在体外经历了pH值依赖的相分离.
- 在体内,能量耗尽和细胞内pH值降低会导致Sup35液滴形成.
- 之前的研究表明,子域驱动Sup35相分离,独立于C端域.
研究的目的:
- 为了研究Sup35蛋白的体内相分离机制.
- 确定Sup35的C端域在其体内分离阶段中的作用.
- 描述能量耗尽的细胞中形成的Sup35组件的性质和组成.
主要方法:
- 在体内使用N终端和M域碎片研究了Sup35相分离.
- 评估了相分离的Sup35与Sup45和Pub1.1的同位素定位.
- 利用循环赫西米德治疗来探测mRNA在Sup35相分离中的作用.
- 在改变的细胞内pH条件下观察到Sup35凝结物的行为 in vivo.
主要成果:
- 缺少C端域的Sup35片段在体内没有分离,这表明C端域的要求.
- 分离相的Sup35与Sup45和应力颗粒标记物Pub1.1进行局部化.
- 循环赫西米德治疗阻止了Sup35相分离,这表明mRNA依赖.
- 与体外发现不同的是,体内Sup35凝结物在细胞内pH升高时不会分解.
结论:
- 在体内Sup35相分离需要C端域和mRNA,形成不同的超分子组合.
- 这些体内组件与体外Sup35液滴有很大的不同.
- 研究结果表明,Sup35在能量耗尽的酵母细胞中形成类似压力颗粒的结构.
