一种改进的方法,通过差分离心来丰富来自Giardia intestinalis的大型细胞外囊泡

科学领域:

• 寄生虫学的寄生虫学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 大肠会导致大肠,一种腹性疾病.
• 细胞外囊泡 (EVs) 介导寄生虫与宿主之间的相互作用.
• 电动汽车的异质性需要改进的隔离方法.

研究的目的:

• 为了丰富来自Giardia intestinalis的大细胞外囊泡 (LEVs).
• 优化EV隔离,以更好地了解寄生虫与宿主之间的相互作用.
• 为了比较LEV缩的不同离心法.

主要方法:

• 由 CaCl2.2.的无血清TYI-S-33介质诱导的Giardia肠道囊泡.
• 在1小时内以15,000×g进行超离心,在4小时内以15,000×g进行离心,在1.5小时内以100,000×g进行离心.
• 通过皮尔斯BCA测定和纳米粒子跟踪分析 (NTA) 来量化EV.

主要成果:

• 在4小时以15,000×g和1.5小时以100,000×g的离心率进行离心,在1小时内缩了超过15,000×g的EV.
• 在4小时内15000×g实现了类似的颗粒度,在1.5小时内达到10万×g.
• NTA显示了更高的LEV度,1.5小时100,000×g和4小时15,000×g.

结论:

• 标准的15,000×g1小时方法对于代表性的LEV隔离是不够的.
• 优化的方法 (1,5小时的100,000×g或4小时的15,000×g) 提高了LEV的丰富度.
• 改进的LEV隔离有助于研究Giardia与宿主相互作用.