扩大分析工具箱:开发新的Lys-C映射方法,最小化试验诱导的人工物,以完全描述抗体

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 制药科学 制药科学

背景情况:

• 类映射对于蛋白质的表征至关重要,包括序列验证和翻译后修改 (PTM) 的评估.
• 标准的三位体映射证明不足以对口服的单域抗体药物Ab-1进行全面分析.
• 由于Ab-1的稳定性和对蛋白质溶解的抗性,因此需要开发替代的基映射策略.

研究的目的:

• 开发新映射方法,以彻底描述Ab-1药物和药物产品的特征.
• 为了实现 Ab-1 的完整序列覆盖,克服了传统的三角形映射的局限性.
• 建立适用于各种抗体格式的可靠和有效的分析方法.

主要方法:

• 开发两种使用基内酶 (Lys-C) 消化方法的新型基映射协议.
• 实施样品准备步骤,不包括淡化/缓冲区交换,缩短处理时间.
• 在中性pH条件下消化,用甲因作为人工物清除剂,以最大限度地减少脱化和氧化.

主要成果:

• 两种开发的Lys-C基映射方法都实现了对Ab-1.0的100%序列覆盖.
• 这些方法在高度药物物质和低度药物产品样本上都显示出可比的性能.
• 简化协议提高了方法的稳定性,减少了样本准备时间.

结论:

• 新的Lys-C映射方法可以全面描述Ab-1,支持产品质量属性 (PQA) 评估.
• 这些方法是高效的,坚固的,适合分析其他抗体格式.
• 开发的协议解决了与稳定,口服的抗体药物相关的分析挑战.