在替代病毒中和化试验中,二聚体ACE2-FC相当于单聚体ACE2
Denis E Kolesov1, Elizaveta A Gaiamova1, Nadezhda A Orlova1
1Federal Research Center of Biotechnology, Russian Academy of Sciences, Moscow, 119071, Russia.
Biochemistry. Biokhimiia
|September 28, 2023
概括
研究人员开发了一种稳定,高产量的ACE2-Fc融合蛋白,用于准确测量SARS-CoV-2中和抗体. 这一进步支持可靠监测免疫反应和潜在的抗病毒疗法,以对抗不断演变的病毒变体.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- ангиотензин转化酶2 (ACE2) 是SARS-CoV和SARS-CoV-2的主要受体.
- 重组ACE2对于代用病毒中和试验 (sVNT) 来评估免疫反应至关重要.
- 可溶性ACE2提供潜在的抗病毒疗法,独立于SARS-CoV-2尖端蛋白突变.
研究的目的:
- 开发一种稳定且普遍适用的可溶性ACE2形式,用于一致的sVNT.
- 为可靠的抗体检测产生高产量的ACE2-Fc融合蛋白.
- 建立基于ACE2-Fc-HRP的sVNT,用于测量针对SARS-CoV-2变种的中和抗体.
主要方法:
- 为ACE2-Fc融合蛋白产生高产细胞系的生成.
- 在瓶中培养细胞系,以获得高蛋白质产量 (>150 mg/L).
- 对ACE2-Fc融合蛋白的亲和性净化及其形式 (二度/四度) 的表征.
主要成果:
- 成功获得了一种生产高生产率的ACE2-Fc融合蛋白的细胞系.
- 通过亲和力净化的ACE2-Fc融合蛋白,尽管是各种形式的混合物,但在结合抑制试验中能够实现线性反应曲线.
- 在sVNT系统中,ACE2-Fc-HRP结合体已被证明是用于实用的抗体测量中的实用性.
结论:
- 开发的ACE2-Fc融合蛋白是一种稳定有效的sVNT试剂.
- 基于ACE2-Fc-HRP的sVNT系统适用于量化对各种SARS-CoV-2变体的中和抗体.
- 这个平台支持监测免疫反应和开发COVID-19治疗策略的持续努力.
