在Esteya vermicola中建立基因表达和淘汰方法CBS115803
Zhijuan Hu1,2, Chi Chen1,2, Xinyao Zheng1,2
1The Chongqing Key Laboratory of Molecular Biology of Plant Environmental Adaptations, Chongqing Normal University, Chongqing, 401331, China.
Molecular biotechnology
|October 1, 2023
概括
这项研究建立了Esteya vermicola的基因转化方法,Esteya vermicola是一种用于生物控制松病的真菌. 研究人员开发了原生质分离,再生和基因操纵的技术,使未来的遗传研究成为可能.
科学领域:
- 菌类学 菌类学是指菌类学.
- 植物病理学 植物病理学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 由Bursaphelenchus xylophilus引起的松病是全球森林的重大威胁.
- 埃斯蒂亚维米科拉是一种有前途的生物控制真菌,可以对抗这种线虫.
- 有限的遗传工具阻碍了E. vermicola作为生物控制剂的发展.
研究的目的:
- 开发和优化Esteya vermicola CBS115803.3的遗传转换技术,以实现这些技术的有效应用.
- 在这种生物控制真菌中建立基因功能分析方法.
- 为了促进E. vermicola的遗传改进,以提高生物控制的有效性.
主要方法:
- 用driselase,snailase和cellulase对真菌细胞壁进行酶性降解以获得原生质.
- 使用0.6M糖糖作为透稳定剂优化原生细胞再生.
- 聚乙烯糖醇介导的原塑转化用于基因改造.
- 鉴定Aspergillus nidulansOlic促进剂用于基因表达增强.
- 针对性基因删除 (EvIPMD) 的分割标记器战略的应用.
主要成果:
- 通过酶处理获得的E. vermicola原塑的高产量.
- 显著的原生细胞再生率约为31%与糖糖稳定.
- 成功建立了聚乙烯糖醇介导的基因转化.
- 通过使用Olic促进剂证明了增强基因表达.
- 使用分裂标记器策略,成功删除了EvIPMD基因.
结论:
- 开发了强大的方法来对Esteya vermicola进行基因操纵.
- 这些技术对于推进E. vermicola的基因功能分析至关重要.
- 已建立的方法为改进生物控制应用的E. vermicola基因工程铺平了道路.
