在人类单细胞中对PAD4进行无偏的蛋白质组分析:新基质,结合伙伴和亚细胞局部化
Mekha A Thomas1, Seok-Young Kim2, Ashley M Curran1
1Division of Rheumatology, Department of Medicine, School of Medicine, Johns Hopkins University, 5200 Eastern Ave, Suite 5200, Baltimore, MD 21224, USA.
概括
达尔吉林脱酶IV (PAD4) 超越细胞核,定位在细胞器和细胞表面. 这种蛋白质素化酶可能在疾病中发挥了新的作用,利用细胞运输通路.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 丁丁氨酸减小酶IV (PAD4) 催化蛋白质素化,这是一个与疾病发病相关的过程.
- 传统上,PAD4被认为是一种核酶,但最近的发现表明它具有核外定位.
- 对于PAD4的核外贩运机制仍然在很大程度上是未知的.
研究的目的:
- 调查PAD4.4的细胞下定位和贩运机制.
- 为了确定参与PAD4细胞内传输的潜在结合伙伴.
- 探索PAD4在单细胞分化和细胞表面表达中的作用.
主要方法:
- 单细胞的亚细胞分离,以分离有机细胞的部分.
- 西方涂抹和免疫光检测PAD4局部化和素化.
- 同免疫沉测试以确定PAD4结合伙伴.
- 在单细胞衍生的树突细胞分化过程中分析PAD4表达和局部化.
主要成果:
- 发现PAD4在单细胞的有机细胞部分中富含,有证据表明有机细胞蛋白的素化.
- PAD4证明与各种细胞质,核和有机体蛋白质结合.
- 在单细胞分化成树突细胞时,PAD4的细胞表面表达增加.
- PAD4与细胞表面上的内细胞/自和分泌途径标记物共定位.
结论:
- PAD4表现出复杂的亚细胞局部化,包括细胞器和细胞表面,超出其核作用.
- 细胞内和细胞表面贩运PAD4可能涉及与蛋白质合作伙伴的相互作用以及内细胞/自和分泌通路的利用.
- 这些发现表明PAD4在生理和病理过程中的新功能.
