使用滴滴微流体分析高吞吐量大合成酶突变物
Farzaneh Pourmasoumi1, Sundar Hengoju2, Katharina Beck3
1Junior Research Group Biosynthetic Design of Natural Products, Leibniz Institute for Natural Product Research and Infection Biology (HKI), Beutenbergstr. 11a, 07745, Jena, Germany.
Chembiochem : a European journal of chemical biology
|October 7, 2023
概括
科学家们开发了一种微流体平台,以检测非核糖体合成酶 (NRPSs) 产生的格拉米西丁S. 该工具通过更快地选NRPS酶活性来加速抗生素发现.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 合成生物学 合成生物学
- 微流体学 微流体学
背景情况:
- 非核糖体合成酶 (NRPSs) 对于生产有价值的天然产品,如抗生素至关重要.
- 开发新的抗生素需要有效的方法来重新设计NRPS途径.
- 目前的选平台缺乏NRPS工程所需的稳定性和速度.
研究的目的:
- 建立一个微流体平台,用于检测非核糖体产量.
- 为了使NRPS突变物能够快速分类和选.
- 为了促进NRPS途径的工程,用于新型抗生素发现.
主要方法:
- 开发了一个微流体平台,利用充满素的传感器脂质体.
- 在透时,脂质体的光度增加,这表明了格拉米西丁S的产生.
- 该平台被用来对NRPS突变体的库进行排序.
主要成果:
- 该平台可靠地检测到了格拉米西丁S的生产.
- 实现了格拉米西丁S生产者的缩14.5倍.
- 观察到内部停止编码子减少250倍,与酶活性相关.
结论:
- 微流体平台为选NRPS活动提供了强大而快速的方法.
- 这项技术可以加速新抗生素的发现,并促进NRPS工程.
- 未来的应用包括先进的结构-活动关系研究和路径工程.
