使用修改后的微型皮皮特器选择单个人类多能干细胞的协议
Sandra P Mojica-Perez1, Kyle Stokes2, Daniel C Jaklic2
1Department of Neurology, University of Michigan, Ann Arbor, MI 48109, USA; The Human Stem Cell and Gene Editing Core, University of Michigan, Ann Arbor, MI 48109, USA.
STAR protocols
|October 7, 2023
概括
这项研究提出了一个新的协议,用于隔离单个人类多能干细胞,使用重新设计的微操纵器. 这种方法有效地产生具有高存活率的同质克隆培养物,避免了细胞分类.
科学领域:
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 生殖技术 生殖技术
背景情况:
- 产生同质的人类多能干细胞 (hPSC) 培养物对于研究和治疗应用至关重要.
- 目前的单细胞隔离方法可能是劳动密集型或需要专门的设备,如细胞分类器.
研究的目的:
- 描述一种用于hPSCs单细胞克隆选择的新,可访问的协议.
- 为了适应通常用于体外受精的STRIPPER Micropipetter,以有效地隔离干细胞.
主要方法:
- 重新使用STRIPPER微管器来挑选单个hPSCs.
- 工具准备,单细胞隔离和殖民地通过的详细步骤.
- 随后进行细胞培养放大和分析的程序.
主要成果:
- 该协议成功生成了同质的克隆hPSC培养物.
- 在孤立的单细胞中实现了超过50%的生存率.
- 该方法不需要使用细胞分类.
结论:
- 重新设计的STRIPPER Micropipetter为hPSCs的单细胞克隆选择提供了一个实用和有效的替代方案.
- 该协议简化了统一干细胞种群的生成,提高了它们在各种研究领域的实用性.
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