两个心脏病蛋白生物标记物的同时检测方法在一个单一的芯片上,该芯片使用表面等离子体共振使用混合的aptamer进行修改
Sang Hyuk Lee1, Ji Hyun Back2, Hyung Joon Joo3
1Department of Chemistry and Green-Nano Materials Research Center, Kyungpook National University, 80 Daehakro, Buk-gu, Daegu, 41566, Republic of Korea.
Talanta
|October 8, 2023
概括
这项研究提出了一种新的方法,可以使用表面等离子体共振在血清中同时检测两种心脏生物标志物,即N-终端亲大脑性尿素 (NT-proBNP) 和瘤缩因子α (TNF-α). 开发的试验准确量化了患者样本中的这些急性心肌梗塞 (AMI) 生物标志物.
科学领域:
- 生物医学工程 生物医学工程
- 分析化学 分析化学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 像NT-proBNP和TNF-α这样的心脏蛋白生物标志物对于诊断急性心肌梗塞 (AMI) 至关重要.
- 现有的检测方法往往缺乏同时定量能力或需要复杂的样本准备.
- 为及时诊断AMI,开发用于多种心脏生物标志物的快速和灵敏测试是必不可少的.
研究的目的:
- 开发和验证使用单个金芯片上的表面等离子体共振 (SPR) 对NT-proBNP和TNF-α的同时检测方法.
- 为了优化aptamer和抗体表面密度,为两个生物标志物的独特动态范围.
- 评估测试在健康对照组和AMI患者的缓冲和未稀释的人类血清样本中的性能.
主要方法:
- 用特定于NT-proBNP和TNF-α的混合体功能化的平面黄金芯片的制造.
- 使用一种三明治试验格式,使用针对性抗体来增强选择性.
- 系统地确定阿巴和抗体表面密度比率,以实现每个生物标志物的独特动态范围.
- 对SPR信号变化 (RU值) 与蛋白质度的相关性,并与ELISA进行比较以验证.
主要成果:
- 确立了NT-proBNP的0.05-0.5nM和TNF-α的0.1-5 pM的独特动态范围.
- 两种生物标志物的低检测和定量限值 (例如,NT-proBNP的0.03 nM,TNF-α的0.06 pM).
- 在健康患者和AMI患者的未稀释血清样本中成功地同时定量NT-proBNP和TNF-α,结果与ELISA相似.
结论:
- 开发的基于SPR的方法可以同时和灵敏地检测NT-proBNP和TNF-α.
- 这种测定为急性心肌梗塞的快速和准确诊断提供了有前途的工具.
- 优化的混合阿普坦芯片为临床诊断中的多重生物标志物检测提供了一个强大的平台.
