天生的淋巴细胞的流细胞计分析:挑战和解决方案
Mona Sadeghalvad1, Davit Khijakadze1,2, Mona Orangi1,2
1Terry Fox Laboratory, British Columbia Cancer, Vancouver, BC, Canada.
Frontiers in immunology
|October 9, 2023
概括
识别先天性淋巴细胞 (ILCs) 需要仔细选择标记物,以避免T细胞污染. 这项研究改进了在各种小鼠组织中区分ILC1,ILC2和ILC3种群的方法.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 天生的淋巴细胞 (ILC) 是具有ILC1,ILC2和ILC3.3亚型的关键免疫细胞.
- 通过流式细胞计量对ILCs的准确识别受到模两可的血统标记 (Lin) 尾酒和T细胞污染的挑战.
- 现有的ILC识别方法各不相同,导致潜在的不准确性.
研究的目的:
- 审查和完善用于识别ILC子集的方法.
- 解决在不同组织中区分ILC种群的挑战.
- 在ILC识别中尽量减少T细胞污染.
主要方法:
- 使用流细胞计与特定的细胞表面标记物组合.
- 设计的血统标记 (Lin) 尾酒,以排除非ILC种群.
- 从林尾酒中分离出TCR/CD3ε抗体,以减少T细胞的污染.
- 通过评估转录因子表达 (GATA3,RORγt,T-bet,Eomes) 确认了ILC识别.
主要成果:
- 开发了不同的表面标记面板,用于在各种小鼠组织中识别ILC1,ILC2和ILC3.
- 通过使用修改后的封闭策略,成功地最小化了T细胞污染.
- 展示了ILC子集的特定组织识别标记,例如肝脏ILC1s和肺/肠/肝脏ILC2s.
结论:
- ILC的鉴定是异质的,需要针对每个亚型和组织量身定制的策略.
- 排除T细胞污染对于准确的ILC子集分析至关重要.
- 使用转录因子表达和优化的表面标记面板的组合,可以提高ILC识别精度.
