在Pichia pastoris中表达和应用阿弗拉托克辛降解酶基因

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 酶工程是什么? 酶工程是什么?
• 食品安全 食品安全

背景情况:

• 毒素,特别是毒素B1 (AFB1),是真菌产生的有毒二次代谢产物,对人类和动物健康构成重大风险.
• 为确保食品和料安全,开发有效的阿弗拉托克辛排毒方法至关重要.

研究的目的:

• 为了在Pichia pastoris中异质地表达三种亚毒素降解酶基因 (tv-adtz,arm-adtz,cu-adtz).
• 评估表达酶的酶活性和亚拉托克辛降解效率.
• 评估AFB1排毒中最有效的酶在不同矩阵中的应用潜力.

主要方法:

• 在Pichia pastoris中,tv-adtz,arm-adtz和cu-adtz基因的异质表达.
• 使用SDS-PAGE检测蛋白质表达.
• 对原始酶溶液的酶活性和降解率的测定.
• 用于AFB1在水相中排毒的应用实验,成的粉碎玉米和DDGS制剂.

主要成果:

• 在Pichia pastoris中成功集成和表达目标基因,由SDS-PAGE证实.
• TV-ADTZ,Arm-ADTZ和Cu-ADTZ的最高酶活性分别为3.57,4.30和2.41U mL-1.
• 亚姆-ADTZ的降解率最高,原始酶溶液的降解率高达60.0%,在应用实验中显示出显著的有效性 (78.94%在水相中,56.48%在成的玉米中,24小时后在DDGS制剂中24.31%).

结论:

• 非洲毒素降解酶基因在Pichia pastoris中成功地表达和分泌.
• 表达的Arm-ADTZ酶显示出强大的阿弗拉托辛B1降解能力.
• 这项研究突出了工程Pichia pastoris菌株在食品和料加工中有效排毒法拉托克辛的潜力.