全球分析后翻译侧链化使用泛化抗体的分析

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学
• 后翻译修改 后翻译修改

背景情况:

• 通过 arginyltransferase 1 (ATE1) 介导的化,涉及将氨酸从tRNA转移到蛋白质基质.
• 以前,化主要与N端酸残留和蛋白质降解有关.
• 新出现的证据表明,ATE1可以修改内部的酸性残留物,扩大 arginylation 的功能范围.

研究的目的:

• 开发用于研究侧链 arginylation 的新型工具.
• 为了进行第一个全球屏幕侧链 arginylation.
• 为了识别受ATE1依赖侧链化影响的蛋白质和细胞通路.

主要方法:

• 产生和验证能够在多种序列环境中检测侧链基化"泛基化"抗体.
• 用这些来自野生型和Ate1淘汰细胞溶解体的抗体,对侧链基化蛋白进行免疫亲和丰富.
• 基于质谱的蛋白质组分析以识别富含蛋白质.

主要成果:

• 成功开发和验证了泛基基化抗体.
• 特定一组经过ATE1依赖侧链基化的蛋白质的识别.
• 在关键细胞过程中,如翻译,拼接和细胞骨组织中,对已识别的蛋白质进行丰富.

结论:

• 侧链化是一种显著的翻译后修改,其影响比以前理解的更广泛.
• 开发的泛基基化抗体为进一步研究这种修饰提供了至关重要的工具.
• 在蛋白质降解之外的基本细胞过程中,ATE1依赖的侧链化起着重要作用.