人类免疫细胞子集的基于氧化还原的表征,采用多色流细胞计
Christina Pitsillidou1, Ivan Muradore2, Elena Pontarini3
1FlowMetric Europe, S.p.A. Via Ariosto, 21, Bresso, MI 20091, USA; Dipartimento di Biotecnologie e Bioscienze, Università degli Studi Milano-Bicocca, Milano, Italy.
STAR protocols
|October 15, 2023
概括
这项研究引入了一种流细胞计法,用于测量免疫细胞中的抗氧化防御和反应性氧物种. 这允许同时对T,B和自然杀手淋巴细胞进行分析.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 像光显微镜和免疫块分析等传统方法缺乏同时测量不同免疫细胞子集中的细胞氧化还原状态的能力.
- 需要一种精简的试验来评估特定的淋巴细胞群中的抗氧化能力和活性氧物种 (ROS).
研究的目的:
- 开发和验证一种新型的流动细胞测量试验,用于同时测量抗氧化剂防御系统和活性氧物种.
- 为了能够在不同的免疫细胞类型中描述细胞氧化还原状态,包括T细胞,B细胞和自然杀手 (NK) 细胞.
主要方法:
- 准备和处理了周围血液单核细胞 (PBMC).
- 细胞通过使用特定的染料和抗体进行了表面和细胞内染色.
- 详细介绍了标准化流细胞计量机的设置,数据采集和分析协议.
主要成果:
- 开发的试验成功地在T,B和NK淋巴细胞中同时测量了抗氧化剂防御标记物和ROS水平.
- 该协议提供了一个全面的工作流程,从细胞准备到数据分析.
结论:
- 这种流式细胞计量试验提供了一种可靠且同时的方法,用于评估关键免疫细胞子集中的细胞氧化还原状态.
- 该技术通过提供同时进行的氧化还原测量,促进了对免疫细胞功能和调节的更深入的理解.
