通过AFM纳米机械成像对EV-脂蛋白混合物进行粒子分析

科学领域:

• 生物物理学的生物物理.
• 纳米技术纳米技术
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 脂蛋白 (LPs) 和细胞外囊泡 (EVs) 分享重叠的物理化学特性,使它们的隔离和表征复杂化.
• 准确地区分LP和EV对于理解它们的生物作用和开发诊断工具至关重要.

研究的目的:

• 使用原子力显微镜 (AFM) 进行混合LP和EV样本的纳米机械查,进行快速的定量检测.
• 根据其独特的机械性质,使协同隔离的LP和EV能够同时进行歧视和表征.

主要方法:

• 基于AFM的定量形态测定测试的应用,用于高通量纳米机械选.
• 在几个小时内测量单个纳米物体直径和机械刚度.
• 机械行为与通过冷电子显微镜 (cryo-EM) 揭示的结构特征的相关性.

主要成果:

• 该AFM测定准确地确定物体直径,与冷-EM测量一致.
• 特定的直径和刚度组合允许同时区分LP和EV,即使有重叠的大小分布.
• 可以估计混合样本中的EV和LP的相对丰度,LP的机械性质与结构特征有关.

结论:

• 基于AFM的纳米机械选提供了一种无标签,单步,快速的方法来分析具有挑战性的EV/LP混合物.
• 这种方法为评估EV和LP分离物的纯度提供了有价值的工具,包括来自血和血清的分离物.
• 该技术克服了既有方法的局限性,例如集体平均和对小颗粒的低灵敏度.