减少和确认循环介导同热放大试验假阳性结果的各种方法:一篇综述
So-Hee Kim1, So-Young Lee1, Unji Kim1
1Department of Food and Nutrition, Kookmin University, Seoul, Republic of Korea.
Analytica chimica acta
|October 20, 2023
概括
循环介导的同热放大 (LAMP) 可能会产生虚假阳性,原因是原始模数和污染. 本综述详细介绍了防止和确认这些错误的方法,从而提高了DNA检测的准确性.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 循环介导同热放大 (LAMP) 是一种敏感的核酸放大技术.
- 原料薄化和转移污染可能导致LAMP结果呈虚假阳性.
- 精确的DNA检测受到错误阳性导致的DNA数量过高估计的阻碍.
研究的目的:
- 审查用于减少LAMP测试中的假阳性结果的技术.
- 概述确认虚假阳性LAMP结果的方法.
- 为了提高基于LAMP的DNA检测的准确性和可靠性.
主要方法:
- 在放大之前,通过有机添加剂 (例如DMSO,贝他因,普鲁兰) 降低DNA聚合酶活性.
- 使用 uracil-DNA-glycosylase (UDG) 来消除传递污染.
- 使用黄金纳米颗粒的热启动策略来最大限度地减少非特异放大.
主要成果:
- 预放大策略有效地减少非特异放大和污染.
- 放大后确认方法,如CRISPR,DNAzyme色度变化和横流免疫试验,可以准确地区分真实阳性和假阳性.
- 这些方法提高了LAMP测定的特异性和可靠性.
结论:
- 实施前放大和后放大策略可以显著提高LAMP检测的准确性.
- 这些技术解决了LAMP的关键局限性,例如假阳性结果.
- 审查的方法为使用LAMP技术可靠检测核酸提供了实际解决方案.
