基于集成芯片的伪双核酸检测的CRISPR/Cas12a辅助可见光
Yuanyuan Zhu1, Jianlin Liu2, Shanna Liu2
1College of Biosystems Engineering and Food Science, Zhejiang University, Hangzhou, 310058, China.
Analytica chimica acta
|October 20, 2023
概括
本研究介绍了一种新的芯片上核酸检测方法,使用CRISPR技术来消除病原体检测中的假阴性. 该系统提供了一种可靠,灵敏和具有成本效益的解决方案,用于点的护理诊断.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子诊断学 分子诊断
- 生物传感器技术技术
背景情况:
- 核酸检测中的假阴性结果对公众健康构成重大风险.
- 现有的内部控制无法防止由于提取或试剂问题导致的假阴性.
- 需要一个强大的方法来克服核酸检测中的假负.
研究的目的:
- 开发一种集成的芯片上检测方法,同时检测目标基因和内部控制.
- 解决当前核酸检测方法的局限性,特别是虚假阴性.
- 为病原体提供可靠和敏感的诊断工具.
主要方法:
- 开发了一个低成本的PMMA芯片,配有用于集成LAMP和CRISPR检测的腔室和通道.
- 使用引力驱动系统在芯片内进行顺序样本处理.
- 使用便携式LED蓝光激发器实现视觉光检测.
- 集成的CRISPR-Cas系统用于特定检测目标基因和内部控制.
主要成果:
- 在单一芯片上实现了目标基因和内部控制的综合检测.
- 证明了高的特异性和灵敏性,检测到低至15个副本/μL的沙门氏菌.
- 启用基于光信号的阳性,阴性或无效结果的视觉确定.
结论:
- 在芯片上的检测方法有效地解决了气溶污染和虚假负面问题.
- 该系统具有高灵敏度,特异性,准确性和成本效益.
- 这项技术为治疗点检测 (POCT) 致病性细菌和病毒提供了一个有前途的新策略.
