细胞检测用于动态定量deubiquitinase活动和抑制的细胞检测

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学
• 药物发现 药物发现 药物发现

背景情况:

• 脱基酶 (DUBs) 是调节蛋白质泛化的关键酶,使其成为瘤学,神经退行性疾病和抗病毒开发治疗干预的关键标.
• 现有的DUB生物化学测定缺乏细胞上下文,限制了临床药物开发中抑制剂疗效的评估.

研究的目的:

• 开发一种敏感的基于细胞的测定方法,用于量化活细胞中二维基酶 (DUB) 活性和抑制.
• 为了能够对DUB抑制剂进行可靠的评估,并促进药物发现工作.

主要方法:

• 开发一种双色流细胞计试验,用于测量DUB活性.
• 测试的应用,以定量抑制剂GRL0617对抗SARS-CoV-2的PLpro.
• 使用纳米体招募系统优化细胞DUB测试 (USP7,USP28).

主要成果:

• 该试验成功量化了GRL0617对SARS-CoV-2PLpro的功效,并确定了潜在的耐药性突变.
• 进行了Yezo病毒vOTU域的结构功能分析.
• 该系统针对细胞DUBs进行了优化,使其能够对抑制剂进行基准测试和动力分析.

结论:

• 开发的流式细胞计量试验为研究细胞环境中的DUB提供了灵敏和多功能平台.
• 这种测试具有显著的潜力,可以加速用于各种治疗应用的DUB抑制剂的发现和开发.