微生物细胞自光作为测量维生素B2和维生素B6细胞内含量的方法

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分析化学 分析化学
• 微生物学 微生物学

背景情况:

• 维生素是必不可少的有机化合物,对细胞和生物的功能至关重要.
• 工业和制药生产的 riboflavin (维生素B2) 和 pyridoxine (维生素B6) 越来越多地利用微生物.
• 需要准确和简单的方法来监测生物技术过程中的维生素合成.

研究的目的:

• 开发一种简单,快速和可靠的光谱法测量方法,用于确定酵母细胞中维生素B2和B6的含量.
• 建立自发光作为一种可行的技术,用于量化细胞内维生素水平.
• 为了比较自光法与已建立的HPLC-UV参考方法.

主要方法:

• 酵母细胞生长,收获,洗,并在缓冲器中重新悬浮.
• 使用特定激发和发射波长测量了皮里多克辛 (λex=340 nm, λem=385 nm) 和 рибофлавин (λex=460 nm, λem=535 nm) 的自发光.
• 确定了检测 (LOD) 和量化 (LOQ) 的极限,并确定了1x10^8细胞/毫升的最小细胞密度.

主要成果:

• 谱流量测量方法表明可靠量化细胞内利博弗拉和氧化.
• 利博夫拉的LOD为<0.005微克/毫升,而氧胺的LOD为<0.05微克/毫升.
• 自体光测量与维生素含量有很好的相关性,与HPLC-UV分析相比,显示出有前途的结果,特别是在 riboflavin.

结论:

• 自体光是一种方便且有效的方法,可以在微生物细胞中快速量化维生素B2和维生素B6.
• 这种光谱计量方法可用于在生物技术生产过程中选酵母中的维生素含量.
• 该方法为监测这些必需维生素的微生物合成提供了有价值的替代方案.