作为血清预处理策略的水性双相系统的协助下,提高了黄素-3量化的准确性
Maria S M Mendes1, Marguerita E Rosa1, João A P Coutinho1
1CICECO - Aveiro Institute of Materials, Department of Chemistry, University of Aveiro, Aveiro, Portugal.
International journal of biological macromolecules
|October 20, 2023
概括
水性双相系统有效地从人体血清中去除高丰度蛋白质,提高素-3生物标志物分析的准确性. 这种预治疗提高了感染和肺癌的诊断和预后能力.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 生物标志物发现发现
背景情况:
- 潘特拉辛-3显示出作为微生物感染和肺癌的诊断和预后生物标志物的潜力.
- 像人血清白蛋白 (HSA) 和免疫球蛋白G (IgG) 这样的丰富蛋白质的矩阵效应阻碍了血清中精确的素-3分析.
- 血清预处理对于减轻这些矩阵效应和提高生物标志物的可靠性至关重要.
研究的目的:
- 开发和评估用于人类血清预处理的水性双相系统 (ABS).
- 通过去除干扰的高丰度蛋白质来提高pentraxin-3分析的准确性.
- 为了优化ABS组合,有效地消耗HSA和IgG,同时提取pentraxin-3.
主要方法:
- 确定各种聚合物酸盐缓冲ABS的双节曲线,以定义相位形成条件.
- 评价ABS在减少HSA和IgG在相间阶段的性能.
- 评估聚合物疏水性在蛋白质耗尽效率中的作用.
- 将素-3提取到富含聚合物阶段的量化.
- 使用酶相关免疫吸收试验 (ELISAs) 对预处理和未预处理血清中素-3水平的比较分析.
主要成果:
- 确定了ABS组合物,将聚合物特性与血清预处理和生物标志物提取性能相关联.
- 具有中等到高水性聚合物显示出有效地消耗HSA和IgG.
- 使用聚乙烯甘醇 (PEG) 1000 g·mol−1 的特定系统实现了>93%的HSA和IgG耗尽和完整的素-3提取.
- 预处理血清的ELISA分析显示相对于未预处理血清 (14.6%) 的相比,相对误差显著降低 (0.8%).
结论:
- ABS作为一种有效的血清预处理方法,可以克服生物标志物分析中的矩阵效应.
- 优化的ABS,特别是PEG 1000 g·mol−1,可以同时耗尽主要干扰蛋白并提取pentraxin-3.
- 这种方法显著提高了素-3量化的准确性,提高了其作为诊断和预后生物标志物的临床实用性.
