建立和描述基于ASFV抗原表位相关的重组蛋白的新型间接ELISA方法
Jiaxin Jin1, Yilin Bai2, Yuanyuan Zhang1
1College of Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou, China; International Joint Research Center of National Animal Immunology, College of Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou, China.
International journal of biological macromolecules
|October 22, 2023
概括
这项研究开发了一种新的非洲猪瘟 (ASF) 诊断测试,使用一种新型重组蛋白. 这种高度敏感和特定的方法为在猪身上检测非洲猪瘟病毒 (ASFV) 提供了一个有前途的工具.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 非洲猪瘟 (ASF) 是一种严重的,致命的猪病,由非洲猪瘟病毒 (ASFV) 引起.
- 目前的诊断方法通常依赖于病毒蛋白质,但 prokaryotic 表达带来了不稳定性和不可溶性等挑战.
- 开发有效的血清诊断工具对于控制ASF疫情至关重要.
研究的目的:
- 选和验证ASFV编码的p72,p54和p30蛋白质的抗原表位.
- 设计和表达一种基于理想结构表观的新型重组蛋白质.
- 为ASF血清诊断建立一个敏感和特定的间接ELISA (iELISA).
主要方法:
- 对ASFV p72,p54和p30蛋白质表位的查和验证.
- 在大肠杆菌 (E. coli) 中设计和表达一种新型抗原性表位相关重组蛋白的核细胞表达.
- 验证使用西斑,针对其他猪病毒病的特异性测试,以及使用参考血清稀释进行敏感性测试.
主要成果:
- 重组蛋白与针对p72,p54和p30的抗体进行了特定的反应.
- 开发了一种具有高特异性的ASF iELISA,它没有与其他常见猪病毒疾病的血清产生交叉反应.
- 该iELISA表现出高灵敏度,检测到血清稀释高达1:6400和实现98%的巧合率与商业ELISA套件.
结论:
- 成功建立了一种新的,特定的和敏感的ASF血清检测方法.
- 开发的iELISA为ASF诊断提供了一个可靠的工具.
- 这项工作为开发改进的ASF血清诊断方法提供了新的途径.
