在阳离子交换染色体列上腺相关病毒囊的稳定性及其对空囊和满囊分离的影响

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 基因治疗 基因治疗
• 生物加工是一种生物加工.

背景情况:

• 复合腺相关病毒 (rAAV) 载体对于基因疗法至关重要,但目前的生产产出的是空和全囊的混合物.
• 为了有效的治疗,分离这些囊是必不可少的.
• 阳离子交换色谱 (AEX) 为这种分离提供了一个可扩展的方法.

研究的目的:

• 调查AEX过程参数对腺相关病毒 (AAV) 囊体稳定性的影响.
• 为了确定在净化过程中保持体完整性的条件.
• 优化AEX以分离空和满的AAV囊.

主要方法:

• 研究了AEX期间结合时间,离子强度和pH对体稳定性的影响.
• 评估了各种离子交换树脂化学和配体密度.
• 分析了囊蛋白的组成和保留时间的变化,使用水友性液体染色学.

主要成果:

• 延长的结合时间 (0-8小时) 改变了空封体,导致保留时间的转移和空封体和满封体之间的分辨率降低.
• 在不稳定的空体中观察到原生病毒体蛋白3 (VP3) 的变化.
• 化在对抗延长结合冲击时稳定体方面表现出显著的有效性.

结论:

• AEX 工艺条件,特别是结合时间,极大地影响了 AAV 体的稳定性.
• 在AEX期间空体的不稳定性与VP3蛋白质的改变有关.
• 化是一种有前途的添加剂,可提高AEX基净化中的AAV囊稳定性.