鉴定和表征一种涉及Acanthamoeba castellanii对宿主细胞粘附的ectophosphatase活动
Luiz Fernando Carvalho-Kelly1, Anita Leocadio Freitas-Mesquita1, Clara Ferreira Pralon1
1Instituto de Bioquímica Médica Leopoldo de Meis (IBqM), UFRJ, Rio de Janeiro, RJ, Brazil.
European journal of protistology
|October 23, 2023
概括
在Acanthamoeba castellanii的传染性热细胞阶段,外酸酶活性较高,对宿主细胞粘附至关重要. 这一发现表明了对抗Acanthamoeba感染的新目标.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 生物化学 生物化学
- 寄生虫学的寄生虫学
背景情况:
- 阿坎萨莫巴 (Acanthamoeba castellanii) 是一种机会性人类病原体,会引起角膜炎和脑炎.
- 热菌对宿主细胞的粘附对A. castellanii的病变产生至关重要.
- 曼诺结合蛋白 (MBP) 是一种关键的毒性因子,它调解了阿米巴粘附.
研究的目的:
- 在A. castellanii.中识别和生化表征ectophosphatase活动.
- 调查ectophosphatase在A. castellanii中对宿主细胞的附作用.
主要方法:
- 生物化学表征ectophosphatase活动,包括动力学分析和抑制剂选.
- 在A. castellanii的体和囊之间比较ectophosphatase活动.
- 在特罗福索伊特与上皮细胞 (LLC-MK2) 相互作用期间检测ectophosphatase活性.
- 使用甲酸盐抑制ectophosphatase活动,以评估其对特罗福索伊特粘附的影响.
主要成果:
- A. castellanii 具有由Mg2+,Co2+和Ni2+刺激的酸性外酸酶活性.
- 确定了p-NPP水解的动力参数 (Km,Vmax).
- 酸盐酶活性在多酸盐中显著高于囊中.
- 活动受到曼诺糖的刺激,并在与LCL-MK2细胞相互作用时增加.
- 甲酸通过抑制ectophosphatase降低了特洛福索伊特粘附.
结论:
- 阿坎萨莫巴 (Acanthamoeba castellanii) 的外酸酶活性在托罗福酸盐与宿主细胞的粘附中起着重要作用.
- 曼诺糖激活的MBP可能刺激了ectophosphatase活动,促进了粘附过程.
- 乙酸酶是阿坎萨摩巴菌感染的潜在治疗点.
