突变和结合:一种方法可以实现快速的细胞内目标验证.
Adam M Thomas1, Marta Serafini1, Emma K Grant2
1Department of Chemistry, Chemistry Research Laboratory, University of Oxford, Mansfield Road, Oxford OX1 3TA, United Kingdom.
ACS chemical biology
|October 24, 2023
概括
药物发现面临的挑战是目标验证. 这项研究引入了一种新的突变和结合方法,使用定位突变和电友片段来快速识别BRD4.4等突变蛋白的选择性小分子抑制剂.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 化学生物学 化学生物学
- 药物发现 药物发现 药物发现
背景情况:
- 标验证是药物发现的关键瓶,导致高消耗率,特别是在II期临床试验中.
- 开发新的方法来增强目标验证对于提高药物发现管道效率至关重要.
- 含odomain蛋白4 (BRD4) 是各种疾病的重要标,但选择性抑制仍然具有挑战性.
研究的目的:
- 开发和验证一种新的"突变和结合"方法,用于快速识别选择性小分子抑制剂.
- 为了证明这种方法的有效性,使用odomain-4蛋白 (BRD4) 作为模型系统.
- 为了确定一个突变的BRD4蛋白 (BRD4(1) L94C) 的选择性抑制剂,并评估其细胞活性.
主要方法:
- 基于结构的设计被用于在BRD4中引入位点定向突变 (L94C),其功能影响最小.
- 对碎片库进行野生型和突变BRD4的选,以确定选择性结合剂.
- 编制具有点击化学标签的识别碎片,用于细胞向参与研究.
- 评估表达野生型或突变型BRD4的HEK293T细胞中的化合物选择性.
主要成果:
- 在BRD4中发现了一种特定的突变 (L94C),这种突变极少影响蛋白质功能.
- 鉴定出了一系列可以选择性地抑制突变型BRD4的片段,而不是野生型BRD4的片段.
- 一种精细的化合物在细胞测试中对BRD4的高选择性得到证明.
- "突变和结合"方法成功地使选择性抑制剂的快速识别成为可能.
结论:
- 局部定向突变和电友片段的组合为快速目标验证和抑制剂发现提供了强大的策略.
- 这种"突变和结合"的方法有助于识别针对特定蛋白质标的选择性小分子抑制剂.
- 鉴定出的选择性BRD4(1)L94C抑制剂作为进一步药物开发和细胞表型评估的起点.
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