一个新的MAS相关的G蛋白合受体X2细胞膜染色学分析模型,基于HALO-tag技术及其应用
Qianqian Jia1, Yanni Lv1, Chenyang Miao1
1School of Pharmacy, Xi'an Jiaotong University, 76# Yanta West Road, Xi'an, 710061, China; Institute of Pharmaceutical Science and Technology, Western China Science &Technology Innovation Harbour, Xi'an, 710115, China.
Talanta
|October 25, 2023
概括
使用HALO标签技术的新细胞膜染色学 (CMC) 模型提高了受体的稳定性和准备速度. 这种先进的MrgX2-HALO-tag/CMC模型可以有效地选传统中医成分,并分析药物受体相互作用.
科学领域:
- 生物化学和生物物理学
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 细胞膜色谱 (CMC) 对于研究跨膜受体,如MAS相关的G蛋白结合受体X2 (MrgX2) 至关重要.
- 现有的CMC模型需要提高方便性和稳定性,以便更广泛地应用.
- 哈洛标记蛋白质技术为受体固定提供了一种新的方法.
研究的目的:
- 使用HALO标签技术开发和验证用于MrgX2受体的新型,稳定和方便的CMC模型.
- 证明新模型在选传统中医药中的生物活性化合物的实用性.
- 以更高的准确性和效率分析联结体受体相互作用.
主要方法:
- 在HEK293细胞中表达的MrgX2-HALO-tag融合受体的构造.
- 用HALO标签基质 (醇) 进行凝修饰,以快速捕获受体.
- 将MrgX2-HALO-tag/CMC模型与HPLC-MS/MS集成,用于化合物识别和配体-受体相互作用分析.
主要成果:
- 与之前的模型相比,MrgX2-HALO-tag/CMC模型表现出更高的稳定性和更长的寿命.
- 桑格农C和莫鲁辛被确定为来自莫里皮层的抗伪过敏成分.
- 灵受体亲和度分析显示了一个一致的顺序:desipramine < imipramine < amitriptyline < clomipramine.
结论:
- MrgX2-HALO-tag/CMC模型为研究跨膜受体提供了一个更强大,更易于使用的平台.
- 这种创新的CMC模型对药物发现和理解复杂的生物相互作用具有重大潜力.
- 这项研究提供了一种宝贵的工具,用于固定含有多跨膜受体的细胞膜.
