对神经元亚型标记物表达在小鼠肌肠的整体解剖方法的比较
Julieta Gomez-Frittelli1,2, Ryan Hamnett2,3, Julia A Kaltschmidt2,3
1Department of Chemical Engineering, Stanford University, Stanford, California, USA.
Neurogastroenterology and motility
|October 26, 2023
概括
研究肠道神经系统 (ENS) 的剖析方法影响神经元亚型量化. 与平板板方法不同,杆式剥离减少了标记标签,突出了胃肠道研究中的变异性.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 胃肠病学 胃肠病学
- 人体解剖学 解剖学 解剖学
背景情况:
- 精确识别肠道神经系统 (ENS) 神经元亚型对于理解胃肠道 (GI) 功能至关重要.
- 关于亚型标记物表达的各种报道可能来自不同的ENS整体解剖技术.
- 这项研究调查了剖析方法在量化ENS标记物表达的变化.
研究的目的:
- 为了比较不同肠道神经系统 (ENS) 整体装载解剖方法对神经元亚型标记物量化的影响.
- 为了确定特定的微切割和固定顺序是否会影响标记物表达分析.
- 为了确定研究肌肉的潜在变异来源.
主要方法:
- 我们比较了三种常见的ENS整体解剖技术:两种平板片制剂和一种杆式剥离方法.
- 评估的变化包括反向方向的平板板剥离和逐步的棒剥离.
- 使用免疫组织化学,遗传记者,共聚焦显微镜和自动图像分析评估标记物表达.
主要成果:
- 在两种平板表格方法之间,卡尔雷丁尼或nNOS表达比例没有显著差异.
- 安装在棒上的剥离显著降低了calretinin和nNOS标记的神经元的比例.
- 安装在棒上的剥皮也减少了dTomato (物质P) 和远距离结肠和大肠中的ChAT标签.
结论:
- 安装在棒上的机械剥离方法减少了几个ENS神经元标记物的标记,包括原生蛋白和转基因记者.
- 在棒剥皮过程中机械操纵似乎是减少标签的原因.
- 在整体肌肉解剖方法中存在显著的变异性,影响了ENS神经元亚型的准确量化.
