在体外获得的玻璃化/加热的猪肉囊中通过电解介导进行基因组编辑
Seiki Haraguchi1, Thanh Q Dang-Nguyen1, Kazuhiro Kikuchi1
1Institute of Agrobiological Sciences, National Agriculture and Food Research Organization, Tsukuba, Ibaraki, Japan.
Molecular reproduction and development
|October 26, 2023
概括
使用CRISPR/Cas9在玻璃化猪肉中进行基因组编辑 (GE) 是可行的. 虽然玻璃化和GE一起减少了胚胎细胞的发育,但GE的效率仍然很高,使未来的研究灵活性.
科学领域:
- 动物遗传学 动物遗传学
- 生殖生物学 生殖生物学
- 基因编辑技术 基因编辑技术
背景情况:
- 集群定期间隔的短时间Palindromic重复 (CRISPR) 相关的9 (Cas9) 系统是各种生物体基因组编辑的强大工具.
- 猪生殖器的玻璃化提供了实验灵活性,但其对后续基因组编辑效率的影响需要研究.
研究的目的:
- 为了评估CRISPR/Cas9介导的基因组编辑在玻璃化猪胚胎中的可行性.
- 评估玻璃化和基因组编辑对猪胚胎发育和基因编辑效率的影响.
主要方法:
- 猪细胞被玻璃化,然后接受CRISPR/Cas9基因组编辑,使用核糖蛋白复合体准OCT4和CD46基因.
- 评估了发育速度到囊胚阶段,并对编辑效率和蛋白质表达进行了测序和免疫细胞化学分析.
主要成果:
- 玻璃化之后的基因组编辑显著降低了胚胎细胞的发育率.
- 对于OCT4 (91.0-95.1%) 和CD46 (93.2-94.5%) 基因,都实现了高基因组编辑效率,而玻璃化和非玻璃化胚胎之间没有显著差异.
- 同时对OCT4和CD46进行双基因组编辑,在玻璃化胚胎中实现了100%的效率.
结论:
- 玻璃化猪胚胎可以有效地用于CRISPR/Cas9基因组编辑,与非玻璃化胚胎相比.
- 尽管发育速度降低,但高编辑效率支持在猪身上进行灵活的基因组编辑实验时使用玻璃化胚胎.
