在CRISPR/Cas13a-Assisted的精确和便携式型肝炎病毒RNA检测中
Yuan Tian1,2, Zihao Fan1,2, Xiangying Zhang1,2
1Beijing Institute of Hepatology, Beijing Youan Hospital, Capital Medical University, Beijing, People's Republic of China.
Emerging microbes & infections
|October 26, 2023
概括
一种新的基于CRISPR-Cas13a的测定方法提供了一种快速,灵敏和便携式的方法来检测肝炎三角病毒 (HDV) RNA. 这一进步有助于监测高强度病毒感染,并评估治疗的有效性.
科学领域:
- 分子诊断学 分子诊断学
- 病毒学 病毒学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 肝炎三角病毒 (HDV) 感染加剧慢性乙型肝炎病毒 (HBV) 的进展,造成严重的健康和经济负担.
- 目前的HDV RNA检测方法缺乏可移植性,准确性和速度.
- 对于HDV RNA,有必要改进诊断工具.
研究的目的:
- 开发一种方便,快速,高度敏感和特定的方法来检测HDV RNA.
- 使用CRISPR-Cas13a技术,以提高诊断能力.
主要方法:
- 已建立的光和侧流带测定,分别将CRISPR-Cas13a与RT-PCR和RT-RAA集成在一起.
- 在144名抗HDVIgG阳性患者队列中评估了诊断性能.
- 对比基于CRISPR的测定与RT-qPCR和RT-ddPCR用于临床样本中的HDV RNA检测.
主要成果:
- 基于CRISPR的光测试表明,合成HDVRNA的灵敏度为1副本/μL,性能优于RT-qPCR和RT-ddPCR (10副本/μL).
- 对于临床样本,RT-RAA-CRISPR测定在大约85分钟内达到10拷贝/μL的灵敏度.
- 与RT-qPCR (66.7%) 和RT-ddPCR (76.4%) 相比,RT-PCR-CRISPR光试验在抗HDVIgG阳性患者中显示出最高的阳性率 (81.9%).
结论:
- 开发了一种基于CRISPR的高灵敏度,特异性,便携性和用户友好的测定方法,用于检测HDV RNA.
- 该测试对监测高强度病毒感染进展具有前景.
- 这项技术有可能用于评估治疗HV的治疗干预措施的有效性.
