大规模制造基组编辑的仿真抗原受体T细胞

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 基因编辑技术的技术
• 细胞治疗学 细胞治疗学

背景情况:

• 基因编辑可以实现精确的基因组点突变,而不需要双链DNA断裂.
• 目前的基编辑交付依赖于线性信使RNA (mRNA),其生产成本昂贵.
• 高昂的制造成本限制了基础编辑应用程序的可扩展性.

研究的目的:

• 利用循环RNA (circRNA) 开发一种成本效益高的协议,用于制造基编辑细胞.
• 为了比较circRNA与线性mRNA的效率和成本,用于基数编辑.
• 为了证明基于circRNA的基编辑用于生产临床级的CAR T细胞的应用.

主要方法:

• 开发了一种使用合成circRNA的基编辑协议.
• 在circRNA和线性mRNA之间比较编辑效率和RNA要求.
• 使用circRNA协议制造基基编辑的仿真抗原受体 (CAR) T细胞.

主要成果:

• 与线性mRNA相比,circRNA显示了更高的编辑效率.
• 使用circRNA.RNA实现了RNA数量的8倍减少.
• 在CAR T细胞中使用0.25μgcircRNA/1 × 10^6细胞实现了高达86%的编辑效率.

结论:

• circRNA是线性mRNA的更有效和更具成本效益的替代方案,用于基编辑.
• 该circRNA协议有助于可扩展的制造基编辑细胞.
• 这种方法显著降低了生产治疗性基因编辑细胞 (如CAR T细胞) 的成本.