在猪尸检样本中快速诊断Streptococcus suis通过thrA基于循环介导的同热放大试验

科学领域:

• 兽医微生物学 兽医微生物学
• 分子诊断学 分子诊断
• 食品安全 食品安全

背景情况:

• 瑞士菌对猪业,公众健康和食品安全构成重大风险.
• 现有的循环介导异热放大 (LAMP) 测定S. suis缺乏适用于临床猪标本的现场适用性.
• 需要一个通用的,现场部署的诊断工具,以有效地识别S. suis.

研究的目的:

• 开发和验证一种新的循环介导同热放大 (LAMP) 试验,用于检测Streptococcus suis.
• 为了评估测试的性能,使用thra家政基因来识别猪大脑和关节组织中的S. suis.
• 将DNA提取方法进行比较,以优化LAMP试验的灵敏度和特异性.

主要方法:

• 开发了一种针对瑞士链球菌 (Streptococcus suis.) 的thra基因的LAMP试验.
• 两种DNA提取方法的比较:LPTV沸和商用套件.
• 使用来自猪的临床脑部和关节抽样验证thra-LAMP试验,以文化检测和实时PCR作为参考方法.

主要成果:

• 与商业套件 (53.8 CFU/反应) 相比,LPTV沸方法的检测极限较低 (1.08 CFU/反应).
• 与LPTV沸相结合的thra-LAMP试验实现了10^4-10^5 CFU/抽样 (大脑) 和10^3-10^4 CFU/抽样 (关节) 的检测极限.
• 对于脑部扫描,pvtv沸的thra-lamp显示了88.0%的灵敏度和95.8%的特异性对培养,和76.7%的灵敏度和100%的特异性对实时PCR.

结论:

• 开发的thra-LAMP测定,加上LPTV沸DNA提取方法,是有效的快速Streptococcus suis检测.
• 这种测试证明了对临床猪标本的现场检查的适用性,特别是脑片.
• 这些发现支持LAMP测试在加强猪群中S. suis的监测和控制方面的有用性.